如何获得重组蛋白

       重组蛋白是通过重组 DNA 或重组 RNA 的技术，利用蛋白表达系统，获得具有一定功能和活性的蛋白质。重组蛋白是生物学研究的重要工具。
       重组蛋白使用表达系统制备时，其途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，将目的蛋白的基因片段与载体连接，形成重组载体之后，将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞，从而表达特定的重组蛋白分子。
       体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达（最常用的大肠杆菌），哺乳动物细胞蛋白表达（常用的细胞 CHO，HEK293），真核表达系统（酵母）及昆虫细胞蛋白表达。
       目前应用最广泛的表达系统有三大类，大肠杆菌（E. coli）表达系统、酵母表达系统、CHO 细胞表达系统。其中，大肠杆菌是表达重组蛋白最常用的宿主菌，已应用于众多高价值药用蛋白的生产。大肠杆菌表达系统具有许多优点，如生长快、培养成本低、遗传背景清晰和可高密度培养等。
       如何为重组蛋白选择一个适合的表达系统呢？这就需要通过重组蛋白的特性、预期的应用场景，以及该系统能否生产足够量的蛋白质等维度来判断。
       不同的表达系统和培养方法显著影响下游的处理过程，目标蛋白的表达是否形成包涵体，蛋白表达的定位（胞内、细胞膜内、周质空间和胞外）、蛋白表达量都依赖于所选择的表达系统。