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琼脂糖DNA凝胶电泳注意事项

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时间:2023-03-10????浏览: ??【 打印此页】??【 关闭


1、Marker的选择
DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的,这样对目标片段大小的估计才比较准确。上海捷瑞企业的DNA Marker条带清晰,亮度均匀,质量稳定,各DNA大小均有对应的DNA ladder,是您实验的首选。需要注意的是Marker的电泳同样也要符合DNA电泳的操作标准。

2、凝胶的染色和观察
实验室常用的核酸染色剂是溴化乙啶(EB),染色效果好,操作方便,但是稳定性较差,具有毒性。一些企业开发出一系列的核酸染料的替代品。如SYBR Green,GelRed等实用性比较强的新型核酸染料。上海捷瑞优化并构建出一系列的质粒,可做出多种长度的DNA片段,以这些片段为基本原料,大家组合构建出一系列的DNA ladder,用以满足客户的实验要求。另外大家根据GelRed染料的特性,开发了一系列与GelRed预混的DNA ladder,与DNA Marker自带的含GelRed的5xLoading dye或用户自己购买的GelRed配合使用,可以很好地替代EB,解决EB毒性问题。由于大家将各条带均针对GelRed电泳进行了优化,常规电泳可以得到比较理想的电泳图谱。注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长,如果激发波长不对,条带则不易观察,出现条带模糊的现象。

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