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一、质粒拷贝数
对于质粒载体,拷贝数是大家最关心的特性之一。实际上,每个细菌中的质粒的拷贝数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质,可以把质粒分为两类:
1、严紧型质粒:当细菌染色体复制一次时,质粒也复制一次,每个细菌内只含1~2个质粒;
2、松弛型质粒:当细菌染色体复制停止后仍然能继续复制,每一个细菌内一般含20个左右质粒拷贝。这些质粒的复制是在寄主的松弛控制之下的,每个细菌中含有10-200份拷贝,如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成还可使质粒拷贝数增至几千份。
当然,恒定的拷贝数与质粒复制控制系统、质粒的大小及培养条件有关。
高拷贝数的质粒往往不稳定,进行大片段克隆或者带有毒性DNA克隆时会用低拷贝;
质粒的扩增会占用大量资源,当载体用于表达或者其他用途时,也会使用上低拷贝质粒。
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