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Catalog_no
BF06002X
Product_name
小鼠单抗Ig类亚类鉴定用酶标二抗即用套装(G1\G2a\G2b\G3\M\A)
Size
6×15ml
Category
杂交瘤融合筛选
Price
1260.00
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小鼠单抗Ig类/亚类鉴定用酶标二抗即用套装说明书
货号
规格
备注
BF06002
6×50ml
可检测500个样品
BF06002X
6×15ml
可检测150个样品
一、原理:
本产品利用间接ELISA法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克隆抗体或特异亲和纯化的单克隆抗体的类和亚类,可区分出 Mouse Ig(G1\G2a\G2b\G3\M\A)。本品为即用型,使用时无需再稀释。
二、
组成成分:
本套装含有Goat Anti-Mouse Ig(G1\G2a\G2b\G3\M\A)-HRP各1支, 共计6支。液体除含有酶标记物外,还含有PBS、防腐剂和稳定剂,每支体积50ml。
三、
使用范围:
用于小鼠单克隆抗体 Ig 类、亚类以及轻链亚型的鉴定以及相关内容的研究。
四、试验所需自备物品:
1. ELISA酶标板及封板膜
2. 与待测抗体特异性结合的对应Ag
3. 抗原包板所用CBS或PBS缓冲液、通用稀释液
4. ELISA用洗涤液(如,PBS-T)
5. ELISA封闭液(如5%脱脂奶粉)
6. TMB底物液
7. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
8. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
9. 吸水纸
10. 可选:反应终止液(如2M硫酸),不加终止液时肉眼观察兰色孔即为阳性
11. 可选:酶标仪(450nm波长滤光片),非定量实验,可肉眼观察
五、操作步骤:
1. 包被:将单克隆抗体特异结合的对应Ag用CB或PBS缓冲液包被酶标微孔板,100μl每孔,合100ng左右,置37℃温育2小时或4℃放置 12小时。
2. 洗涤:用洗板机PBS-T洗一遍,或甩去包被液用PBS-T手洗一遍即可。
3. 封闭:每孔加200ulELISA用封闭液,置37℃温育2小时或4℃放置 12小时。
4. 洗涤:用洗板机PBS-T洗三遍,或甩去封闭液用PBS-T手洗三遍。
5. 待测一抗:准备待测杂交瘤细胞株培养上清或用PBS-T稀释的单抗腹水(一般稀释1000倍),每株待测样本加一排共计12孔(您也可以不做复孔只加6孔),每孔100μl,置37℃温育30分。
6. 洗涤:用洗板机PBS-T洗5遍,或吸去样品液用PBS-T手洗5遍(常规方法操作)。
7. HRP标记分型二抗:将本产品的6种酶标记物每种加2孔每孔100μl共12孔(不做复孔则每种加1孔每孔100ul共6孔),置37℃温育30分。
8. 洗涤:用洗板机PBS-T洗5遍,或吸去酶标抗体液用PBS-T手洗5遍(常规方法操作)
9. 显色:加TMB显色液37℃避光显色20分钟即可判定结果。
备注:本酶特异性很好一般本底极低,肉眼观察兰色孔即为阳性;那么参看此阳性孔对应的酶标二抗就知道此株单抗的Ig类别。
10. 可选步骤:与显色液等体积加入2M硫酸终止反应,后用酶标仪450、630纳米双波长读数判定。
备注:单抗属于人为干预得来,有一定比例的变异存在,原则上以高值孔对应的亚类为准!
六、
产品特点:
高灵敏度、高特异性、无交叉反应,检测样品范围广泛结果容易判定。当然
您如果觉得很多试剂要自己准备很麻烦那您可以登陆网站选择大家为您准备的整套试
剂盒产品 BF06001小鼠单抗 Ig 类/亚类鉴定用 ELISA 试剂盒。
七
、保存条件:
2-8℃避光保存。有效期1年。
八
、注意事项:
请在有效期内使用。本试剂为即用型,过于在强光或不良环境中频繁开启管 盖有可能因此使效期缩短。显色必须使用 TMB 系统。
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