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Catalog_noBF06205
Product_name慢病毒浓缩试剂
Size50ml/100ml
Category病毒包装试剂
Price640.00/1060.00
说明书
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    一、产品描述

    本慢病毒浓缩试剂为5×浓缩液,可以对慢病毒颗粒进行简单快速的浓缩。该试剂操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并孵育一段时间,正常转速离心,即可得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。

    二、操作步骤

    1.   收集细胞培养上清液,0.45μm滤膜过滤,去除细胞和碎片。
    【注】:滤膜过滤需使用低蛋白吸附的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。切忌用硝酸纤维素膜(NC)。
    2.    将慢病毒上清液与试剂盒中的浓缩液按照体积比4:1的体积混合(上清液4份,浓缩液1份),混匀后4℃静置,每隔30min混匀一次,混匀共进行3次。4℃孵育2h或过夜。
    【注】:延长孵育时间可以提高回收率。慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。
    3. 4℃,4000g离心30min。
    4.  小心去除上清,不要剧烈晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
    5. 用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100的DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
    6.    重悬后的病毒以50µl/管分装,-80℃冰箱保存。
    【注】:慢病毒冻存液避免反复冻融,否则会降低病毒滴度。

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