无缝克隆差别于传统式PCR物质复制，唯一的不同取决于媒介尾端和引物设计尾端应具备15-20个同宗碱基，从而获得的PCR物质两边便各自戴上了15-20个与媒介编码序列开放阅读框的碱基，借助碱基间相互作用力相辅相成匹配成环，不用酶连就可以马上用以转换寄主菌，进到寄主菌中的线形质粒借助本身酶系将空缺修补。
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       下面博奥龙小编先容一下无缝克隆的技术原理。
       分子克隆的引物设计及目地DNA片段的增加，与基本PCR法是一致的。唯一的不同取决于媒介尾端和引物设计尾端应具备15-20个同宗碱基，从而获得的PCR物质两边便各自戴上了15-20个与媒介编码序列开放阅读框的碱基。根据有关酶实验试剂解决，与此同时去除媒介与目地DNA上同宗精彩片段的发夹结构中的一条链，那样媒介和目地DNA两边就外露了可以相辅相成匹配的编码序列，借助同宗编码序列碱基间的匹配能使媒介和目地DNA比较密切的连在一起而不用酶联，马上用以转换。