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慢病毒实验流程??
时间:2022-06-23????浏览: ??【 打印此页】??【 关闭


      慢病毒载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。
      博奥龙/biodragon是一家由留学归国人员创办的生命科学领域高新技术企业,专业从事新型生化试剂的研发和销售。企业理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式,使生命科学研究变得更轻松、更高效。
      下面博特龙小编先容一下慢病毒实验流程。
      1. 根据目的基因相关信息,构建含有外源基因或siRNA的重组载体;
      2. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量的不含内毒素的重组质粒;
      3. 使用高效重组载体和病毒包装质粒共转染293T 细胞,进行病毒包装和生产,收集病毒液;
      4. 浓缩、纯化病毒液;
      5. 用高质量的病毒液感染细胞;
      6. 通过定量PCR精确测定病毒滴度和Western 分析实验结果;
      7. 用高质量的病毒液感染宿主细胞;检测基因功能或者siRNA的沉默效率以及使用药物进行稳定转染细胞株的筛选,通常状况下,筛选的细胞克隆株具有长期的表达稳定性。

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